itraq技术服务(LC-MS/MS)
分类: 最上层  发布时间: 2019-07-03 10:05 

itraq技术服务(LC-MS/MS)
  • 提供商: 上海天贺生物科技有限公司
    服务名称: itraq技术服务(LC-MS/MS)
    规格: 8000元/蛋白样本
    iTRAQ技术:isobaric tags for relative and absolute quantitation,同位素标记相对和绝对定量技术,是蛋白质组研究最新技术,可同时比较4种或8种不同样品中的蛋白质进行相对或绝对定量分析。

    技术特点和优势:反应速度快、标记完全、重复性好、误差相对较小
       
    实验方法:  
       操作时首先对不同蛋白质样品分别进行酶解,采用不同的标记对酶解片段进行标记后混合,结合色谱分离和后续的串联质谱鉴定,从对不同样品蛋白进行分离和鉴定。

    实验原理
       iTRAQ的4种同位素标记试剂由4种相对分子质量为114、115、116和117的报告基团,相对分子质量分别为31、30、29 和28 的质量平衡基团以及一个相同的肽反应标记试剂基团组成。不同的报告基团分别与相应的平衡基团相配后,相对分子质量均为145。
       由于iTRAQ试剂是等量的,即不同同位素在标记同一多肽后在第一级质谱检测,分子量完全相同,用串联质谱方法对在第一级质谱检测到前体离子进行碰撞诱导解离,产物离子通过第二级质谱进行分析。在二级质谱分析过程中,报告基团、质量平衡基团和多肽反应基团之间的键断裂,质量平衡基团丢失,产生低质荷比(m/z)的报告离子。由于二级质谱可分析相对分子质量相差1的报告基团,不同报告基团离子强度的差异就代表了它所标记的多肽的相对丰度。同时,多肽内的酰胺键断裂,形成一系列b 离子和y 离子,得到离子片段的质量数,通过数据库查询和比较,可以鉴定出相应的蛋白质前体。
       
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